擴增產物為。其中a2,3,6,9,10,b1為陽性。擴增3’端長臂使用引物：neof:5’-cgccttcttgacgagttcttctga-3’；gm3’lrr:5’-ggtgcttgagtagtgttgaatctcagtggacca-3’結果見圖3中b，擴增產物為。其中：a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子，+/+為野生型對照。5將步驟4得到的雜合子小鼠動物與轉基因鼠flper鼠交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠；6將步驟5得到的gm20541基因條件性敲除雜合子小鼠相互交配繁育，得到gm20541基因條件性敲除純合子小鼠；7將步驟6得到的gm20541基因條件性敲除純合子動物與轉six3-cre基因動物交配，得到視網膜前體細胞gm20541基因敲除小鼠。轉基因鼠flper鼠購自美國捷克森實驗室(品系名稱：(rosa)26sortm1(flp1)dym/rainj)。six3-cre轉基因小鼠(mgi：3574771)由美國德克薩斯大學安德森中心贈送。six3是一個前腦腹側和視網膜前體細胞的標志性轉錄因子，其特異性驅動cre基因在視網膜前體細胞表達，cre蛋白可以進入細胞核，識別基因組上loxp位點，實現基因敲除。基因敲除小鼠鑒定步驟：對上述視網膜前體細胞敲除gm20541基因的小鼠的基因型鑒定，操作如下：(1)剪小鼠尾梢少許組織樣本，置于干凈的；(2)在離心管中加入100μl裂解液。因此，外科結扎膽總管并使膽總管完全阻塞已成為引起嚙齒動物梗阻性膽汁淤積性損傷的常用模型。北京大鼠動物模型構建

酒精性肝病(AH)大鼠模型建模方法【方法】1、正常組大鼠自由飲水。2、酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease，AFL)模型組大鼠自由飲用酒精飲料，其酒精濃度從5%開始，每個濃度維持一周，依次改為10%、15%、20%、25%、30%、35%至40%，以40%濃度持續至12周。3、在實驗過程中，各組大鼠均給以普通顆粒飼料，共持續為12周。4、第12，動物禁食12h，稱重，下腔靜脈取血處死，血液離心取上清備用。【檢測】1、生化指標檢測檢測ALT、AST、TC、TG、FFA、LDL-C、HDL-C和血糖的含量。2、組織病理學酒精性脂肪肝模型組大鼠肝臟體積增大，明顯腫脹，包膜緊張，邊緣圓鈍，呈奶黃色，切面油膩，腹腔內尤以有腹膜后脂肪堆積明顯。HE染色顯示，正常組肝臟內無明顯脂肪變性，肝小葉結構正常，肝細胞索圍繞靜脈呈放射排列。模型組肝臟彌漫大量脂肪變性，細胞體積增大，呈氣球樣變。3、標志因子水平ELISA法測定血清中TNF-α和ApoB的含量。江蘇模式動物模型可以簡化實驗操作和樣品收集。

技術實現要素：本發明的目的在于提供利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用，采用該構建方法可以得到視網膜色素變性疾病模型，該模型可表現出視網膜色素變性性疾病特征，該模型可用于視網膜色素變性性疾病的研究，可以幫助闡明rp的發病過程及機制，并為該疾病的或預防提供新的靶標。本發明是這樣實現的：方面，本發明實施例提供了一種利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法，其包括：敲除目標動物視網膜前體細胞中的基因組中的gm20541基因。

其也是可以作為視網膜色素變性疾病模型的。以上所述為本發明的實施例而已，并不用于限制本發明，對于本領域的技術人員來說，本發明可以有各種更改和變化。凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。sequencelisting四川省人民醫院利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用111406dna人工序列1gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttact60ggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcac120tgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaag180acatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtga240taaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaa300actctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaataca360taaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgc420atgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatg480tagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactca540cagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcg600tcttctagaacataaaaggacacatactgga。大鼠面癱模型的建立。

脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱重，按體重計算藥物用量。2、脂多糖（LPS）藥物配制，生理鹽水溶解，根據小鼠體重配制終濃度為10mg/kg，200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠，捏緊小鼠頸背部皮膚，小拇指無名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下，這樣腹腔中的就會自然倒向胸部，防止注射器刺入時損傷腸道。進針的動作要輕乘，防止刺傷腹部。5、注射器吸取準備好的藥物，腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進針注射LPS，注射完藥物后，輕微旋轉針頭退針，防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進行組織病理學檢查。【檢測】肝組織有無：1、肝水腫；2、肝出血；3、炎性細胞浸潤；4、肝組織腫大等病理改變。再觀察肝損傷程度，各按程度積分為：0分為無該項病理改變；1分為病理變化輕且很局限；2分為病理變化中等且局限；3分為病變中等但或局部很；4分為非常的理改變。求出各動物的各項病理改變的總和，作為肝損傷程度積分。特發性肺纖維化（IPF）小鼠模型建立。哪里有動物模型實驗室

博萊霉素是具有多種抗腫瘤作用的多組分，其毒副作用之一是引起肺纖維化。北京大鼠動物模型構建

通過無極調控微負壓裝置來調節飼養倉2內的壓力，通過高原低氧環境模擬裝置來調整飼養倉2內氧含量，當需要燈光時，通過高原光照環境模擬裝置15開啟紫外燈以及照明燈，通過高原溫度環境模擬裝置16來進行調溫，通過高原濕度環境模擬裝置17調節飼養倉2內濕度，通過動物行為學遠程觀察單元18可以監控動物的行為，飼養倉2內若干代謝籠3配備投料斗8、飲水瓶9可以進行攝食量、飲水量測定，聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12便于模型動物的尿液和糞便常規檢測，并且本系統設置的多個代謝籠3可以同時培養多種動物，造模動物多。實施例2在實施例1的基礎上提供的一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統，所述無極調控微負壓裝置包括進風系統13、排風系統14和霍尼威爾或西門子調控模塊，所述進風系統13設置在功能設備集成底座1內，所述排風系統14設置在飼養倉2頂部。本實施例的工作原理：本系統進風系統13內集成有進風風機單元、排風系統14集內成有排風風機單元。由于飼養倉2能夠密封，通過改變風機風量的方式來調節壓差，進風風機單元和排風風機單元均與飼養倉2連通，通過調節進、排風的壓力差值，系統內環境能夠形成(～)微負壓，系統配置霍尼威爾或西門子調控模塊。北京大鼠動物模型構建