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云南實驗動物模型造模

來源: 發(fā)布時間:2024-02-05

    導(dǎo)師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細(xì)記好實驗記錄,只要是和實驗相關(guān)的,無論是照片,還是文字,必須要及時事無巨細(xì)地詳細(xì)記錄。并且要備份好每一份實驗記錄。我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實驗記錄本」上面,然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。時間規(guī)劃首先,個人是不贊同每天24小時泡在實驗室的,高效率是關(guān)鍵。建議提前一天規(guī)劃好第二天需要做的事情,按照代辦事項的格式逐條列出,哪一個時間段需要做什么事情?這樣的好處有兩點,一個是自己提前把時間預(yù)約好,可以留出足夠的時間休息和娛樂;另一個是在執(zhí)行計劃的時候往往會有一種時間緊迫感,辦事起來往往更高效且不會遺漏。總之,預(yù)實驗就是迷你版正式實驗,希望小伙伴們在進(jìn)行預(yù)實驗的時候一定要盡可能地準(zhǔn)備周全,這樣才能快的推進(jìn)正式實驗。APOE-/-鼠左頸動脈結(jié)扎糖尿病模型。云南實驗動物模型造模

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    表明在gm20541敲除鼠視網(wǎng)膜外節(jié)變短退化。sixko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型小鼠;dapi(4',6-diamidino-2-phenylindole):細(xì)胞核染料4',6-二脒基-2-苯基吲哚;rhodopsin:視紫紅質(zhì)抗體;merge:兩種顏色重疊。具體實施方式為使本發(fā)明實施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚,下面將對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者,按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者,均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。以下結(jié)合實施例對本發(fā)明的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。實施例11采用rt-pcr方法檢測gm20541基因在不同組織的表達(dá)情況。方法:分別提取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾的總rna,然后用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。根據(jù)gm20541的cdna序列設(shè)計引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3';gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3'。以提取的cdna為模板,進(jìn)行rt-pcr。擴增后進(jìn)行電泳,結(jié)果見圖1。結(jié)果見圖1中a和b,可以看出,通過rt-pcr方法檢測gm20541基因在小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾中的表達(dá)。北京大鼠動物模型實驗室脂多糖(LPS)聯(lián)合煙熏法致慢性阻塞性肺部疾病小鼠模型。

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    常見的有組織病理染色、WesternBlot、PCR等),實驗儀器是否需要預(yù)約使用。如果需要外送生物公司檢測,需要提前聯(lián)系好商家,以及了解清楚樣本如何獲取,如何運輸。飼養(yǎng)動物及干預(yù)動物購買后需要將時間節(jié)點提前規(guī)劃好,比如,周需要做什么?測量體重?觀察飲食?測量需要的指標(biāo)?中間有無特殊操作?比如灌胃、測量體重、做CT檢測、取血?……第幾周取材?取材需要哪些組織?預(yù)實驗方案就要提前設(shè)計清楚以上內(nèi)容。取材及樣品準(zhǔn)備取材需要提前到動物房禁食、稱體重、取出動物、手術(shù)器械的消毒、組織固定所需要的試劑和EP管,WesternBlot和PCR所需要的樣本儲存條件。比如凍存管、EP管,是否需要冰塊?是否需要液氮?取材當(dāng)天需要多少人?是否需要請人幫忙?如果所需要取出的樣本較多,建議大家請人一起幫忙,流水線作業(yè),這樣能節(jié)省時間,并且能保證樣品的質(zhì)量。如果請人,每個人需要負(fù)責(zé)哪一板塊的工作,比如誰負(fù)責(zé)麻醉,誰負(fù)責(zé)取血液,誰負(fù)責(zé)取,誰負(fù)責(zé)拍照、誰負(fù)責(zé)儲存,都需要提前規(guī)劃交代清楚。實驗指標(biāo)檢測如果是需要自己做的檢測,比如常見的WesternBlot、PCR,建議提前可以看看教程(無論是視頻還是貼吧,都要自己多方參考)。有了一定的理論基礎(chǔ)后。

    然后5%的nds。含有%triton)封閉通透2h,孵育一抗,4℃過夜。第二天,pbs清洗三次后,孵育相應(yīng)的熒光二抗,然后再用pbs清洗三次,封片,觀察。結(jié)果見圖8,在小鼠4月齡時,通過視網(wǎng)膜冰凍組織切片染色外節(jié)抗體rhodopsin以及內(nèi)節(jié)抗體nak-atpase后發(fā)現(xiàn),相較于野生型小鼠,gm20541基因敲除純合子小鼠(圖中sixko)視網(wǎng)膜外節(jié)明顯縮短,表現(xiàn)出了明顯退化表征。綜上,可以看出,本發(fā)明實施例以小鼠為例,通過cre-loxp基因敲除技術(shù),在小鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中特異性敲除gm20541基因,小鼠表現(xiàn)出了視力受損,視細(xì)胞外節(jié)變短退化以及視細(xì)胞丟失等視網(wǎng)膜色素變性疾病典型表征。由此充分說明,在視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因,可以使目標(biāo)動物表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性疾病。視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因的動物,可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型。該疾病模型可以用于視網(wǎng)膜色素變性疾病研究等領(lǐng)域中,為該疾病的研究例如發(fā)病過程、機制以及相關(guān)藥物的篩選提供一種新的模型。雖然本發(fā)明實施例展示了在小鼠的視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因后的表型,但本領(lǐng)域技術(shù)人員容易理解到,小鼠作為哺乳動物的代表性動物,在其他的哺乳類動物中敲除gm20541基因或其同源基因也應(yīng)當(dāng)具有相似的表型。用血管內(nèi)線栓阻斷法制備大鼠 MCAO模型。已被腦血管病研究者接受和采用。

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    進(jìn)而使一些生長因子受體磷酸化。方法:有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周齡雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮膚。在DMBA涂抹一周后,每周兩次將TPA(40nmol)施用到相同部位。模型驗證:幾周后,小鼠背部皮膚上出現(xiàn)色素沉著斑點。組織學(xué)研究表明,小鼠真皮組織中色素細(xì)胞積累,某些色素細(xì)胞表現(xiàn)出嵌套的形態(tài)學(xué)模式。缺點:化學(xué)誘導(dǎo)黑素瘤小鼠模型缺乏與人類疾病的臨床相關(guān)性。另外,此類模型可用于研究陽光對黑色素細(xì)胞痔轉(zhuǎn)化為侵襲性的黑色素瘤的過程中起的作用。由于小鼠模型的免疫系統(tǒng)功能,因此也可以用于研究免疫策略。二、移植性模型移植模型是目前應(yīng)用多的模型。應(yīng)用:移植接種的黑色素瘤小鼠模型概括了黑色素瘤原位發(fā)展、轉(zhuǎn)移的一些特點,多用于抗和轉(zhuǎn)移藥物評估。1同種移植模型同種移植模型是將小鼠黑素瘤細(xì)胞接種到具有相同遺傳背景的小鼠中獲得小鼠黑素瘤模型。此模型包括ICR小鼠的Harding-Passey黑色素瘤模型、DBA小鼠的S91黑色素瘤模型、C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤模型,其中C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤是常用模型。優(yōu)點:同種移植模型具有免疫能力,可通過黑色素細(xì)胞與免疫細(xì)胞之間固有的相互作用來研究黑色素瘤與微環(huán)境的關(guān)系。博來霉素誘導(dǎo)急性肺損傷小鼠模型。上海模式動物模型造模

肺泡上皮細(xì)胞及內(nèi)皮損傷,造成彌漫性肺間質(zhì)及肺泡水腫,導(dǎo)致的急性低氧性呼吸功能不全。云南實驗動物模型造模

    但是人為調(diào)節(jié)更能直接的根據(jù)所需模擬出實驗環(huán)境,相對于自動控制的環(huán)境模擬能有效減少意外情況的發(fā)生。2、本系統(tǒng)設(shè)置的多個代謝籠可以同時培養(yǎng)多種動物,造模動物多。3、本實用新型的系統(tǒng)能夠很好地模擬高原壓力、溫度、濕度以及低氧環(huán)境,還具有動物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察功能,保障了實驗過程中實時監(jiān)控與實驗結(jié)束后操作過程的溯源。附圖說明為了更清楚地說明本實用新型實施例的技術(shù)方案,下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹,應(yīng)當(dāng)理解,以下附圖示出了本實用新型的某些實施例,因此不應(yīng)被看作是對范圍的限定,對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講,在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下,還可以根據(jù)這些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。圖1為本實用新型一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)的主視圖;圖2為本實用新型一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)的立體結(jié)構(gòu)示意圖;圖3為代謝籠的立體結(jié)構(gòu)示意圖;圖中標(biāo)記:1-功能設(shè)備集成底座,2-飼養(yǎng)倉,3-代謝籠,4-觀察窗,5-操作窗,6-小物件傳遞窗,7-大物件傳遞窗,8-投料斗,9-飲水瓶,10-聚糞斗,11-尿液排出口,12-糞便排出口,13-進(jìn)風(fēng)系統(tǒng),14-排風(fēng)系統(tǒng),15-高原光照環(huán)境模擬裝置,16-高原溫度環(huán)境模擬裝置。云南實驗動物模型造模

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