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來源: 發布時間:2023-12-11

    轉基因小鼠對黑色素瘤發生的分子途徑的理解有重要意義。此外,轉基因小鼠是可靠且可重現的模型,用來評估受損基因對黑色素瘤生物學的影響。應用:基因工程小鼠模型可用于研究特定基因組改變在黑色素瘤的發生和發展的重要性及藥物的靶向。1Lum-/-基因敲除小鼠Lumican是一種富含亮氨酸的小蛋白聚糖(smallleucine-richproteoglycan,SLRP),為膠原原纖維形成的關鍵調節劑。黑色素瘤中Lumican表達降低與浸潤相關。方法:有研究者利用BamHI建立的克隆衍生物導入胚胎干細胞,建立Lum-/-轉基因小鼠。該模型可提供與發生和轉移相關機制及可見變的進展,以及確定負責的黑色素瘤進展的基因。2Tyr::N-RasQ61K轉基因小鼠方法:有研究者使用突變的人N-RasQ61K和SV40剪接以及聚腺苷酸化序列生成Tyr::N-RasQ61K構建體,并注射到卵母細胞中,建立Tyr::N-RasQ61K轉基因小鼠。3BrafV600E轉基因小鼠模型有研究者使用LoxP-stop-LoxP(LSL)/Cre重組酶技術從內源性Braf基因中誘導BrafV600E表達,建立BrafV600E轉基因黑色素瘤小鼠模型??偨Y目前已有三種不同的黑色素瘤小鼠模型,但由于實驗動物與人類基因組、基因調控、細胞類型、結構與組成等方面是有一定差別。通過阿霉素(Adriamycin,ADR)腹腔注射給藥(Adriamycin,ADR)試圖造成小鼠心衰。寧夏C57動物模型手術

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    糖尿病足大鼠模型【目的】構建糖尿病足大鼠模型;【材料】1、材料:STZ藥物、注射器、檸檬酸、檸檬酸三鈉;2、試劑配制:1)檸檬酸納緩沖液配制:A液十B液=1:,PH=;A液:檸檬酸mL;B液:朽檬酸三納2)STZ液配制:55mg/kg(避光,現配現用10min內注射);3、糖尿病模型構建方法:1)大鼠術前禁食12h;2)按55ug/g注射.連續3天注射,對照組注射檸檬酸緩沖液,造模組注射STZ液,注射后不禁水、禁食2-4h;3)STZ注射結束5天后空腹測血糖,血糖值高于12mmol/L選入實驗組;【方法】方法一:細菌懸浮液造模1、糖尿病模型大鼠第二周至第三周時,后足背側注射l0ul金黃色葡萄球菌懸浮液,造成糖尿病肢端的動物模型;2、后續觀察傷口情況;方法二:皮膚劃傷造模1、三周后糖尿病大鼠后足足背手術剪做一個圓形皮膚創口,直徑5mm;2、后續每日觀察傷口情況,作好記錄。云南模式動物模型服務骨質疏松癥是目前世界上發病率、死亡率和醫療保健消耗較大的疾病之一,已成為全世界范圍的嚴重的社會問題。

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    IgA腎病小鼠模型【目的】建立IgA腎病小鼠模型,并觀察模型的生化及病理指標特點?!静牧稀?、酸化水:鹽酸調滅菌水;2、蓖麻油+CCl4:5:1配制;3、LPS:;4、血清白蛋白BSA:800mg/kg用量,滅菌水配制;【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次,配制160mg/ml,灌胃100ul/只,持續8周;2、同時皮下注射蓖麻油和CCl4(5:1),1次/周,持續8周;3、分別于第6、8周以()尾靜脈注射LPS,1次/周;4、每兩周取24h尿液一次觀察尿蛋白及紅細胞;5、每日觀察精神、飲食、大小便,第9周處死,取血和腎、肝做相應檢查;6、取尿液后2000r/min離心10min,取上清用全自動生化儀檢測尿蛋白肌酐比值,鏡下觀察尿沉渣中有無紅細胞。

    brain:腦組織;liver:肝臟;retina:視網膜,intestine:腸;muscle:肌肉;heart:心臟;kidney:腎臟;spleen:脾;b:圖1中a的統計結果;c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達;d:圖1中c的統計結果。圖2:gm20541基因敲除小鼠的構建路線;圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖3:中長距離pcr鑒定子一代鼠的結果;圖中:a:擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產物為;其中a2,3,6,9,10,b1為陽性;b:擴增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr,擴增產物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子,+/+為野生型對照。圖4:gm20541基因敲除小鼠的鑒定;a:gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結果;b:實時定量pcr實驗分析gm20541敲除小鼠視網膜中基因敲除效率,證明gm20541在敲除小鼠視網膜中不再表達;sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖5:暗適應視網膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結果;圖中:a-c:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖軌跡圖;d:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網膜電圖a波統計。它主要影響身體內的大中動脈,如冠狀動脈、頸動脈、腦動脈和腎動脈等,其發病機制的主要過程。

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    相較于施用所述候選藥物前,所述視網膜色素變性疾病模型的視力提高;(2)施用所述候選藥物后,相較于施用所述候選藥物前,所述視網膜色素變性疾病模型的視網膜外核層變厚;(3)施用所述候選藥物后,相較于施用所述候選藥物前,所述視網膜色素變性疾病模型的視網膜外節增長。第四方面,本發明實施例提供了一種視網膜色素變性疾病模型的繁育方法,其包括:將由如上所述的方法得到的視網膜色素變性疾病模型進行自交。在由方面所述的構建方法得到了視網膜色素變性疾病模型的基礎上,為了獲得更多的視網膜色素變性疾病模型,本領域技術人員容易想到直接將上述的構建方法得到的視網膜色素變性疾病模型進行自交以繁育或培育出更多數量的視網膜色素變性疾病模型,這也是屬于本發明的保護范圍。附圖說明為了更楚地說明本發明實施例的技術方案,下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹,應當理解,以下附圖示出了本發明的某些實施例,因此不應被看作是對范圍的限定,對于本領域普通技術人員來講,在不付出創造性勞動的前提下,還可以根據這些附圖獲得其他相關的附圖。圖1:檢測gm20541基因在不同組織中的表達;圖中:a:rt-pcr檢測gm20541基因在不同組織的表達結果。通過博來霉素誘導的肺炎樣癥狀及肺纖維化癥狀模型為研究ALL的有效措施提供理想的動物模型。云南外包動物模型建模

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    其也是可以作為視網膜色素變性疾病模型的。以上所述為本發明的實施例而已,并不用于限制本發明,對于本領域的技術人員來說,本發明可以有各種更改和變化。凡在本發明的精神和原則之內,所作的任何修改、等同替換、改進等,均應包含在本發明的保護范圍之內。sequencelisting四川省人民醫院利用gm20541基因構建視網膜色素變性疾病模型的方法和應用111406dna人工序列1gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttact60ggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcac120tgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaag180acatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtga240taaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaa300actctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaataca360taaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgc420atgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatg480tagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactca540cagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcg600tcttctagaacataaaaggacacatactgga。寧夏C57動物模型手術

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