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浙江推薦的HE染色檢測

來源: 發布時間:2025-05-27

HE染色堿染料染主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著色。學上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法。蘇木精 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸顆粒呈強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白液體呈粉紅色。HE染色需要哪些材料及實驗步驟。浙江推薦的HE染色檢測

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HE染色切片中出現類似色素樣的點狀結晶和黑色光滑的細胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,以至于二甲苯揮發切片干燥所致。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,重新處理。將切片水洗數分鐘,然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,盡量不要讓其干燥。細胞核呈紅、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足。對策:首先,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,發現氧化過度應及時更換。其次,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等,在蘇木精染色后,給切片以足夠的藍化時間。浙江推薦的HE染色檢測海馬組織HE染色如何觀察。

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HE染色樣本組織固定與切片:首先將組織樣本進行常規的石蠟包埋。在模具中加入液態石蠟,將待包埋的組織樣本放入石蠟中,確保組織位置規整。補充少許液態的石蠟后,進行降溫冷凍,使石蠟變為固態達到組織固定的效果,然后使用石蠟切片機進行切片,厚度在4-8um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟:將待測組織樣本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,浸泡完后更換二甲苯繼續浸泡10min,目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,這樣可以在進行染液染色的時候,染液可以充分進入組織種,同時,二甲苯還可以起到透明的作用,使切片更容易觀察。

HE染色:在組織病理學中,蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規染色方法。常規蘇木素染色的對比染色是用伊紅,也有采用焰紅,因為焰紅比伊紅色澤更鮮明,還有采用橘黃G,比布里希猩紅,波爾多紅等作為對比染色。伊紅是比較常用的胞質染料,本身溶于醇而不溶于水,為磚紅色粉末狀或醬紅色結晶。配方:伊紅Y(水溶)0.5-1g,蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y(醇溶性)應當溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,可以加速其染色過程,使得胞質的色澤更加艷麗。結果是細胞核呈藍色,胞質、肌肉、結締組織、紅細胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍色或紫藍色。肺部組織HE染色如何觀察。

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HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法:1)二甲苯使用過久,含蠟成分太高或脫蠟效果差:可更換二甲苯驗證。2)切片經烤片,冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低;延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少,幅度太小;可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久,導致乙醇中二甲苯含量過高,二甲苯殘留在切片上(由于二甲苯與水不相溶,切片上有二甲苯的地方,蘇木精就沒有辦法滲透進去,在切片染色完成后留下了點狀的不著**域):更換各道乙醇驗證。5)二甲苯、乙醇質量不佳(偶有試劑瓶內裝的試劑與試劑名不相符):換批號驗證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯:需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯:需重新配置驗證。8)烤片時間短,切片上水分沒有烤干,也會導致著色不勻,出現點狀發白區域。HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片。浙江推薦的HE染色檢測

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HE染色原理:一、細胞核染色原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。二、細胞漿染色原理:細胞漿內主要成分是蛋白質,為兩性化合物、細胞漿的染色與pH值有密切關系,當pH調到蛋白質等電點4.7-5.0時,胞漿對外不顯電性,此時酸或堿性染料不易染色。當pH調到6.7-6.8時,大于蛋白質的等電點pH值,表現酸性電離,而帶負電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,現時胞核也被染色,核和胞漿難以區分。因此必須把pH調至胞漿等電點以下,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學合成的酸性染料,在水中離解成帶負電荷的陰離子,與蛋白質的氨基正電荷(陽離子)結合而使細胞漿染色,細胞漿、紅細胞、肌肉、結締組織,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍色的細胞核形成鮮明的對比浙江推薦的HE染色檢測

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