影響熒光壽命成像測量的因素:高濃度樣品的影響:1)當激發光照射高濃度樣品時,在激發光入口附近產生熒光,但這些熒光并不能進入熒光檢測器。2)高濃度的分子之間相互作用而發生活性阻礙現象。3)熒光的再吸收:即熒光光譜的短波長端和激發光譜的長波長端如果相互重疊,則發生熒光再吸收。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。散射光的影響: 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影響較大。校正辦法:先用短的激發光激發,檢出溶液的拉曼峰,然后進行熒光光譜校正。因為熒光光譜不隨激發光波長的改變而改變,而拉曼光卻隨之改變。熒光壽命成像(FLIM)可用于測量分子環境參數,通過熒光共振能量轉移進行的蛋白質相互作用。湖南紅外熒光壽命成像售價
熒光壽命成像可以運用在哪些地方?熒光壽命成像顯微技術已在生命科學領域中得到了普遍的應用。成像,擴散光學層析成像,熒光相關光譜等等。使用我們專有的多維時間相關單光子計數技術(TCSPC),我們的FLIM和TCSPC系統具有超高光子效率的特點。因此,科學家,醫生,研究人員和其他用戶能夠進行TCSPC FLIM顯微鏡檢查,多波長FLIM,同時FLIM和快速獲取FLIM。生命科學是我們熒光壽命成像顯微(FLIM)設備的主要應用領域。經常用于以下領域:分子影像學、代謝成像、FRET成像、同時進行NAD(P)H和pO2成像。福建植物熒光壽命成像怎么樣熒光壽命成像可用于多種生物應用,包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動力治理、DNA芯片分析等。
熒光壽命成像可以在體現熒光物質形貌信息之外,還能夠靈敏地反應熒光基團生化特性以及周圍微環境的變化情況。將熒光壽命成像與共聚焦成像技術結合起來,實現人體三維熒光壽命成像,進一步實現人體三維功能成像奠定基礎,有潛力應用于瘤識別,病變診斷等領域。熒光壽命是熒光基團在通過發射熒光光子返回基態之前在其激發態下保持平均多長時間的量度。不同熒光基團激發態停時間不同,大多數生物熒光素的熒光壽命時間在 0.2 - 20 ns。熒光壽命檢測經典方法為點對點的時間相關單光子計數(TCSPC),但由于過去檢測硬件的局限和復雜的使用而沒有被普遍地應用于科學研究。隨著技術的發展,在顯微鏡視野內進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。
熒光壽命成像主要應用領域包括:用于樣品分離,如利用不同染料熒光壽命的差異將不同組織、正常與病變細胞等有效分離。熒光團在光譜上非常相似(max 580 vs 573)無法分離,但它們在熒光壽命上差異明顯。作為生物傳感器,如評價藥物/理化條件對細胞的影響、Ca+震蕩等。充分拓展了壽光命成像的使用范圍,實現可相互驗證的多維度樣品成像。實現真正的生物動力學分析和功能成像。熒光壽命成像的發展很好地彌補了基于強度成像的問題,對生物醫學檢測有著重要的意義。熒光壽命顯微成像具有高特異性、高靈敏度、可定量測量微環境變化。
熒光壽命成像和生物發光的不同之處:產生光子的原理不同,類似于我們都是通過肉眼去觀察螢火蟲和發光水母一樣,生物發光與熒光成像在本質上,都是機體中特定的細胞或材料發出光子,被高靈敏度的CCD檢測到形成圖像,但是生物發光與熒光壽命成像產生光子的過程和機制是完全不同的。生物發光與熒光成像相同點:都需要對細胞進行標記。生物發光產生的光子和熒光壽命成像產生的光子都可以被高靈敏的CCD檢測并形成圖像,就像一個人的眼睛就可以既看到螢火蟲又可以看到發光水母一樣。熒光壽命(FLT)是熒光團在發射光子并返回基態之前花費在激發態的時間。根據熒光基團的不同,FLT可以從皮秒到數百納秒不等。熒光壽命成像技術可顯示單指數或多指數熒光衰減。福建植物熒光壽命成像怎么樣
熒光成像技術可以實時和多維度地清晰地監測生物分子、細胞、組織和生物生物。湖南紅外熒光壽命成像售價
熒光壽命成像與傳統的使用熒光強度和光譜信息作為鑒別組織異常的成像方式相比,壽命成像提供了更多的生化診斷信息。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。另外,采用多光子激發可顯著提高組織體的成像深度,如對人體皮膚自體熒光進行多光子激發熒光壽命成像,成像深度達200 um,組織體的熒光壽命分布揭示了細胞代謝狀態的變化,可用于對皮膚病的診斷。對腔體中瘤的早期臨床診斷,已開發出具有實時及壽命分辨功能的內窺鏡,并對離體膀胱樣品進行測試,得到了黃素分子的自體熒光壽命圖像。湖南紅外熒光壽命成像售價
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