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浙江三維熒光壽命成像使用步驟

來源: 發布時間:2023-03-10

熒光壽命成像和生物發光的不同之處:產生光子的原理不同,類似于我們都是通過肉眼去觀察螢火蟲和發光水母一樣,生物發光與熒光成像在本質上,都是機體中特定的細胞或材料發出光子,被高靈敏度的CCD檢測到形成圖像,但是生物發光與熒光壽命成像產生光子的過程和機制是完全不同的。生物發光與熒光成像相同點:都需要對細胞進行標記。生物發光產生的光子和熒光壽命成像產生的光子都可以被高靈敏的CCD檢測并形成圖像,就像一個人的眼睛就可以既看到螢火蟲又可以看到發光水母一樣。熒光壽命(FLT)是熒光團在發射光子并返回基態之前花費在激發態的時間。根據熒光基團的不同,FLT可以從皮秒到數百納秒不等。熒光壽命檢測經典方法為點對點的時間相關單光子計數。浙江三維熒光壽命成像使用步驟

熒光壽命成像可以運用在哪些地方?熒光壽命成像顯微技術已在生命科學領域中得到了普遍的應用。成像,擴散光學層析成像,熒光相關光譜等等。使用我們專有的多維時間相關單光子計數技術(TCSPC),我們的FLIM和TCSPC系統具有超高光子效率的特點。因此,科學家,醫生,研究人員和其他用戶能夠進行TCSPC FLIM顯微鏡檢查,多波長FLIM,同時FLIM和快速獲取FLIM。生命科學是我們熒光壽命成像顯微(FLIM)設備的主要應用領域。經常用于以下領域:分子影像學、代謝成像、FRET成像、同時進行NAD(P)H和pO2成像。杭州三維熒光壽命成像采購熒光壽命成像和生物發光的不同之處:生物發光與熒光壽命成像產生光子的過程和機制是完全不同的。

紅外熒光壽命成像技術在生物多重檢測中的應用。相比于熒光強度,熒光壽命的數值具有很好的穩定性,不依賴于生物組織穿透深度。因此可以實現生物多重成像和量化診斷。該團隊利用能量延遲方法并結合對發光離子濃度的調控,實現NIR-II區單一波長下熒光壽命三個量級以上的精確調節。將這種成像方法應用于乳腺的精確診斷,其對標志物的定量檢測結果與傳統的免疫印跡法和免疫組織化學法相比有很好的一致性。而相比于后兩者一次只能對一種標志物進行檢測,這種新的時間維度成像方法可以原位實現同時定量多個標記物,并且減少了傳統檢測方法在組織切片的制作、處理以及評分過程中所導致結果的差異性。

熒光壽命成像具有什么優勢?熒光壽命成像的優勢:通過熒光強度成像可以獲得熒光分子的空間分布,較為直接和簡便,但是當熒光分子具有相似的頻譜特性,或是同樣的熒光分子在不同環境下時,依賴強度進行成像的方案便無法準確反映信息。與基于光強的成像方式不同,FLIM成像適用于測量熒光分子環境的變化,或是測量分子的運動情況。其結果與熒光分子濃度無關,且不受影響光強的光散射或是光吸收影響,可以精確測量熒光淬滅過程,對生物分子微環境進行定量測量。熒光壽命成像具有的高靈敏度、可檢測人體生物樣品等優點。

影響熒光壽命成像測量的因素:高濃度樣品的影響:1)當激發光照射高濃度樣品時,在激發光入口附近產生熒光,但這些熒光并不能進入熒光檢測器。2)高濃度的分子之間相互作用而發生活性阻礙現象。3)熒光的再吸收:即熒光光譜的短波長端和激發光譜的長波長端如果相互重疊,則發生熒光再吸收。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。散射光的影響: 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影響較大。校正辦法:先用短的激發光激發,檢出溶液的拉曼峰,然后進行熒光光譜校正。因為熒光光譜不隨激發光波長的改變而改變,而拉曼光卻隨之改變。熒光壽命不受熒光探針的濃度的影響,可排除納米材料的胞吐分化導致的納米顆粒的稀釋等對測量的影響。江蘇化學熒光壽命成像操作步驟

生物發光與熒光壽命成像不同點:產生光子的原理不同。浙江三維熒光壽命成像使用步驟

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