熒光壽命成像主要應用領域包括:用于樣品分離,如利用不同染料熒光壽命的差異將不同組織、正常與病變細胞等有效分離。熒光團在光譜上非常相似(max 580 vs 573)無法分離,但它們在熒光壽命上差異明顯。作為生物傳感器,如評價藥物/理化條件對細胞的影響、Ca+震蕩等。充分拓展了壽光命成像的使用范圍,實現可相互驗證的多維度樣品成像。實現真正的生物動力學分析和功能成像。熒光壽命成像的發展很好地彌補了基于強度成像的問題,對生物醫學檢測有著重要的意義。測量熒光壽命需要極快響應時間的探測器。江門熒光壽命成像大概多少錢
熒光壽命成像是一種什么樣的技術?是一種新型的熒光成像技術,它能夠對不同種類或處于不同狀態的生物組織提供更好的對比度,并反映熒光團及其所處微環境參數的定量分布。熒光壽命成像一般不受諸如激光或熒光強度擾動、熒光染料分布不均勻、染料的光漂白以及其他有礙熒光強度的因素的影響,是熒光光譜分析法的有效補充。超快激光技術,高速、高靈敏度探測技術,以及圖像處理技術的發展,都促進了FLIM 技術的發展.尤其是將熒光壽命成像和共焦顯微技術以及多光子激發熒光顯微技術結合,進一步拓寬了FLIM在生物學領域的應用范圍。湖北紅外熒光壽命成像哪家便宜熒光壽命成像不受光漂白的影響。
熒光壽命的測量和熒光壽命成像主要有時間相關單光子計數法(time correlated single photon counting, TCSPC)、門控探測法(time-gated detection)、條紋相機測量法(streak-FLIM)、頻閃技術等四種常見的方法。TCSPC是目前測量熒光壽命的主要技術,同軸脈沖光源發出的脈沖光引起起始光電倍增管產生電信號,該信號通過恒分信號甄別器1啟動時幅轉換器(time-amplitude converter,TAC),時幅轉換器產生一個隨時間線性增長的電壓信號。此外,同軸脈沖光源發出的脈沖光通過激發單色器后到達樣品池,樣品產生的熒光信號再經過發射單色器到達終止光電倍增管,由此產生的電信號經由恒分信號甄別器2到達時幅轉換器并使其停止工作。
熒光壽命成像開始用于組織體的在體成像,與傳統的使用熒光強度和光譜信息作為鑒別組織異常的成像方式相比,壽命成像提供了更多的生化診斷信息。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。另外,采用多光子激發可顯著提高組織體的成像深度,如對人體皮膚自體熒光進行多光子激發熒光壽命成像,成像深度達200 um,組織體的熒光壽命分布揭示了細胞代謝狀態的變化,可用于對皮膚病的診斷。對腔體中瘤的早期臨床診斷,已開發出具有實時及壽命分辨功能的內窺鏡,并對離體膀胱樣品進行測試,得到了黃素分子的自體熒光壽命圖像。熒光壽命成像不需要考慮跳色的影響,從而免去了計算和去除跳色雜質信號的麻煩。
熒光壽命檢測經典方法為點對點的時間相關單光子計數(TCSPC),但由于過去檢測硬件的局限和復雜的使用而沒有被普遍地應用于科學研究。隨著技術的發展,在顯微鏡視野內進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。熒光壽命成像提供了壽命分布的二維圖形視圖。該圖形視圖使任何觀察者都能快速區分和分離FLIM圖像中的不同壽命種群。相量FLIM分布的解釋很簡單。因為每個物種都有特定的相量,所以可以在單個像素內解析多個分子物種。熒光壽命顯微成像,可以定位不同的分子及濃度分布,在生物,材料,半導體領域具有重要的應用價值。北京開放式熒光壽命成像哪里買
熒光壽命成像技術可顯示單指數或多指數熒光衰減。江門熒光壽命成像大概多少錢
在使用TCSPC測量熒光壽命的過程中,需要調節樣品的熒光強度,確保每次激發后較多只有一個熒光光子到達終止光電倍增管。TCSPC方法的突出優點是靈敏度高、測量結果準確、系統誤差小。采用該技術對樣品進行熒光壽命成像時,必須逐點測量樣品的熒光壽命,而每一點的測量時間又比較長,因此,通常認為該技術不太適合熒光壽命測量。不過,近年來,隨著TCSPC技術和固體超快激光技術的發展,TCSPC技術已具備快速測量熒光壽命的條件。通過與激光共聚焦顯微鏡的結合,可以對樣品進行熒光壽命成像的測量。江門熒光壽命成像大概多少錢
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