熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。時間域測量方法涉及用短光脈沖照射樣品（比色皿、細胞或組織），然后隨時間測量發射強度。FLT由衰減曲線的斜率確定。有幾種熒光檢測方法可用于壽命測量，其中時間相關單光子計數（TCSPC）可實現簡單的數據收集和增強的定量光子計數。頻域方法涉及高頻率入射光的正弦調制。在該方法中，發射發生在與入射光相同的頻率處，并且隨著激發光兼有相位延遲和振幅的變化（解調）。壽命測量不需要波長比率探針來提供眾多分析物的定量測定。壽命法通過使用光譜位移探針擴展了分析物濃度范圍的靈敏度。壽命測量可用于沒有直接探針的分析物。包括葡萄糖、抗原或基于熒光能量轉移轉導機制的任何親和力或免疫測定。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。福建顯微熒光壽命成像哪里有
熒光壽命成像裝置通常由激發光源、光電探測器、延遲儀器及圖像處理設備組成。門控儀器的光源通常為短脈沖的超快激光器，常見的成像設備是CCD，延遲儀器提供FLIM的控制信號。由于光電探測器和CCD等器件輸出的是光強度信息，熒光壽命圖像可以通過Rapid Lifetime Determination （RLD）和Weighted Nonlinear Least Square （WNLLS）兩種處理方法利用熒光強度圖像通過反演得出。熒光壽命成像（FLIM）有時域和頻域測量法，時域測量中主要有TCSPC技術、門控探測技術、條紋相機探測技術和頻閃技術；頻域測量法中主要是調制技術。每一種測量技術在測量樣品成像的過程中都有優勢和劣勢，在實際測量樣品的熒光壽命時，需要根據實際的樣品裝填而綜合考慮選擇合適的熒光壽命測量技術。福建顯微熒光壽命成像哪里有熒光壽命成像擴展了傳統熒光成像的維度，是功能成像的理想工具；
受光學衍射極限的限制，熒光顯微技術的空間分辨率只能達到200納米左右，難以滿足生命科學研究的需要。而對于熒光壽命成像來說，其空間分辨率受衍射極限的影響尤為嚴重。熒光壽命成像是一個新興的研究領域，尋求具有高度原創性的技術原理與方案，并率先解決熒光壽命成像在生命科學應用中存在的難題，具有重大的科學意義與應用價值。一種熒光壽命成像方法，所述方法包括下述步驟：對標記于樣品中的光開關染料分子進行稀疏激勵；激發樣品中被激勵的光開關染料分子，收集被激發的光開關染料分子所發射的光子并記錄光開關染料分子的熒光圖像，對熒光圖像中的光開關染料分子進行質心定位；對在質心定位處接收到的光子進行計數，確定被激發的光開關染料分子的熒光壽命；結合得到的光開關染料分子的質心定位結果和熒光壽命，構建熒光壽命圖像。
門控探測法適用于單組分熒光強度衰減的測量和熒光壽命成像。熒光壽命可通過在兩個不同延遲時刻開啟的相同寬度的門內記錄的熒光強度信息求得，通常情形下，在條件允許的情況下，采用多門控探測，即選取多個窗口獲取多幅圖像（通常為5~10幅）來反演壽命圖像。一般使用門控微通道板像增強器（MCP Intensifier）或者增強型CCD（Intensified CCD）相機，實現樣品的寬場（full-field）熒光壽命成像。通過在樣品受到超短光脈沖激發后的不同時刻（時間窗口）選通像增強器或CCD相機，獲得一組熒光強度圖像，然后利用公式，逐點計算出樣品上各點的熒光壽命并成像。熒光壽命成像可以提供熒光強度（光子數）和光子壽命的空間分布。
熒光壽命成像：作為熒光成像中除光譜和強度之外的新維度，當前，熒光壽命成像主要應用領域包括：用于樣品分離，如利用不同染料熒光壽命的差異將不同組織、正常與病變細胞等有效分離。熒光團在光譜上非常相似（max 580 vs 573）無法分離，但它們在熒光壽命上差異明顯。作為生物傳感器，如評價藥物/理化條件對細胞的影響、Ca+震蕩等。充分拓展了壽光命成像的使用范圍，實現可相互驗證的多維度樣品成像。實現真正的生物動力學分析和功能成像。熒光壽命成像是一種重要的熒光顯微鏡技術。重慶生物熒光壽命成像哪里有
影響熒光壽命成像測量的因素有哪些？福建顯微熒光壽命成像哪里有
熒光壽命成像技術及其在生物醫學中的應用：熒光分子的壽命就像熒光分子的激發光譜和發射光譜一樣是熒光分子的固有特性，隨著近年來對蛋白及分子功能研究的不斷深入，科研工作者除對多色成像、鈣成像等功能成像的需求日漸增多之外，對熒光壽命成像的需求也逐漸增加，而熒光壽命成像能提供除熒光強度、熒光光譜信息之外的熒光分子的壽命信息，可用于分子間相互作用（FRET）、分子所處微環境的離子濃度（如Ca2+、pH）及細胞代謝水平的改變等測量，并可拆分光譜重疊的熒光染料及染料和自發熒光，還可以結合熒光相關光譜對單分子實現熒光壽命相關光譜FLCS的測量。熒光壽命成像擴展了傳統熒光成像的維度，是功能成像的理想工具，在生物醫學領域有廣闊的應用前景。福建顯微熒光壽命成像哪里有
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