熒光壽命成像技術（Fluorescence Lifetime ImagingMicroscopy，FLIM）是一種在顯微尺度下展現熒光壽命空間分布的技術，由于其不受樣品濃度影響，具有其他熒光成像技術無法代替的優異性能，目前在生物醫學工程、光電半導體材料等領域是一種重要的表征測量手段。熒光和熒光壽命：分子包含多個單能態S0、S1、S2…和三重態T1…，每個能態都包含多個精細的能級。正常情況下，大部分電子處在*低能態即基態S0 的*低能級上，當分子被光束照射，會吸收光子能量，電子被激發到更高的能態S1 或S2 上，在S2 能態上的電子只能存在很短暫的時間，便會通過內轉換過程躍遷到S1 上，而S1 能態上的電子亦會在極短時間內躍遷到S1 的*低能級上，而這些電子會存在一段時間后通過震蕩弛豫輻射躍遷到基態，這個過程會釋放一個光子，即熒光。此外，亦會有電子躍遷至三重態T1 上，再由T1 躍遷至基態，我們稱之為磷光。熒光壽命成像可以提供熒光強度（光子數）和光子壽命的空間分布。上海多色熒光壽命成像好不好

熒光壽命(FLT)是熒光團在發射光子并返回基態之前花費在激發態的時間。根據熒光基團的不同，FLT可以從皮秒到數百納秒不等。熒光團群的壽命是指經熒光或非輻射過程的能量損失后，激發態分子數量以指數方式衰減到原始數量的N / e（36.8％）的時間。熒光壽命是熒光團的固有屬性。FLT不依賴于熒光團濃度、樣品吸收、樣品厚度、測量方法、熒光強度、光漂白和/或激發強度。它受外部因素影響，如溫度、極性和熒光淬滅劑的存在。熒光壽命對依賴于熒光團結構的內部因素敏感。佛山植物熒光壽命成像價格熒光壽命成像具有不同于熒光強度成像的眾多優點；

在基于時間相關單光子計數的熒光壽命成像實驗中，通過選用超快激光器可以優化脈沖持續時間，單光子探測器和時間數字轉換器的時間抖動則成為制約時間分辨率的關鍵參數。熒光壽命成像可進行高質量的多色成像實驗或實現STED、PALM/STORM等超分辨率熒光顯微成像。目前TCSPC是主要應用的熒光壽命測定技術。熒光壽命通常在ps～us量級，在如此短的時間量級上進行測量，它是較為成熟準確的測試手段。TCSPC的工作原理是使用一個同步信號源驅動激光器，出射光脈沖照射樣品池，在利用光子探測裝置（多為PMT）對熒光信號進行探測，每一個光子計數信號在FT1010中都會落入一個對應的時間窗口，經過一定時間的統計疊加后即得到熒光壽命曲線。幾十萬次重復以后，不同的時間通道累積下來的光子數目不同。

熒光壽命成像和生物發光的異同點是什么？生物發光與熒光壽命成像不同點：產生光子的原理不同，類似于我們都是通過肉眼去觀察螢火蟲和發光水母一樣，生物發光與熒光成像在本質上，都是機體中特定的細胞或材料發出光子，被高靈敏度的CCD檢測到形成圖像，但是生物發光與熒光壽命成像產生光子的過程和機制是完全不同的。生物發光與熒光成像相同點：都需要對細胞進行標記。生物發光產生的光子和熒光壽命成像產生的光子都可以被高靈敏的CCD檢測并形成圖像，就像一個人的眼睛就可以既看到螢火蟲又可以看到發光水母一樣。除此之外，生物發光和熒光壽命成像都需要對目標細胞進行標記，讓細胞產生熒光素酶或者熒光蛋白。熒光壽命顯微成像是熒光壽命測量和熒光顯微技術的結合。

熒光壽命成像FLIM所面臨的挑戰：在數據處理上，由于曲線擬合迭代過程的需求，計算成本較其他成像方案更高。在成像原理上，熒光壽命受多種外界因素影響，這些因素包括分子相互作用、pH值、溫度和粘滯阻力等，很難對這些參數控制變量，使得測量熒光壽命存在交叉干擾問題。此外，與普通光學顯微技術類似，介質光散射影響成像信噪比及空間分辨率，成像深度受到限制。FLIM已經在系統裝置、熒光探針和數據處理算法等方面得到了較快的發展，這也使得熒光壽命成像FLIM在對細胞微環境成像和生物代謝監測發揮出不可替代的作用。結合多種先進成像系統，如雙光子成像、結構光照明等，可進一步提升熒光壽命成像FLIM的分辨率和測量精度。另一方面，提升熒光壽命解調的算法性能，將壓縮感知、深度學習等熱點算法與FLIM結合，也同樣對FLIM的發展起著至關重要的作用。總的來說，熒光壽命成像FLIM的發展很好地彌補了基于強度成像的問題，對生物醫學檢測有著重要的意義。熒光壽命取決于熒光分子所處的微環境，通過對樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。湖南多色熒光壽命成像售價

熒光壽命成像主要通過TCSPC技術實現。上海多色熒光壽命成像好不好

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