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廣東三維熒光壽命成像怎么用

來源: 發布時間:2022-05-27

熒光壽命成像:作為熒光成像中除光譜和強度之外的新維度,當前,熒光壽命成像主要應用領域包括:用于樣品分離,如利用不同染料熒光壽命的差異將不同組織、正常與病變細胞等有效分離。熒光團在光譜上非常相似(max 580 vs 573)無法分離,但它們在熒光壽命上差異明顯。作為生物傳感器,如評價藥物/理化條件對細胞的影響、Ca+震蕩等。充分拓展了壽光命成像的使用范圍,實現可相互驗證的多維度樣品成像。實現真正的生物動力學分析和功能成像。熒光壽命成像(FLIM)對細胞信號傳導及調控,蛋白間的相互作用等生物研究發揮著很大作用。廣東三維熒光壽命成像怎么用

熒光壽命成像技術(Fluorescence Lifetime ImagingMicroscopy,FLIM)是一種在顯微尺度下展現熒光壽命空間分布的技術,由于其不受樣品濃度影響,具有其他熒光成像技術無法代替的優異性能,目前在生物醫學工程、光電半導體材料等領域是一種重要的表征測量手段。熒光和熒光壽命:分子包含多個單能態S0、S1、S2…和三重態T1…,每個能態都包含多個精細的能級。正常情況下,大部分電子處在*低能態即基態S0 的*低能級上,當分子被光束照射,會吸收光子能量,電子被激發到更高的能態S1 或S2 上,在S2 能態上的電子只能存在很短暫的時間,便會通過內轉換過程躍遷到S1 上,而S1 能態上的電子亦會在極短時間內躍遷到S1 的*低能級上,而這些電子會存在一段時間后通過震蕩弛豫輻射躍遷到基態,這個過程會釋放一個光子,即熒光。此外,亦會有電子躍遷至三重態T1 上,再由T1 躍遷至基態,我們稱之為磷光。深圳單分子熒光壽命成像熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。

熒光壽命成像可以應用到個性化化療:要針對患者所患的特殊病癥,找到較有效的抗病藥物至關重要。但是,病細胞對不同類型藥物的反應并不是完全可預測的。因此,進行活檢,將細胞培養并用不同的藥物處理。同時,它們被FLIM重復成像。熒光壽命表明治理后細胞代謝狀態的早期改變。因此,通過這些測量,只需幾天即可確定較有效的藥物。熒光壽命成像將時域多指數衰減分析與相量圖相結合。時域中熒光衰減的測量需要短的激發脈沖和快速的檢測電路。樣品中的每個點都被依次激勵。使用時域方法,壽命是從對衰減數據的指數擬合得出的。

熒光壽命成像顯微術(FLIM)是一種利用熒光染料固有特性的成像技術。除了具有特有的發射光譜外,每個熒光分子還有特有的壽命,它反映了熒光基團在發射光子之前處于激發態的時間。除了標準的熒光強度測量外,壽命分析還可以提供其他信息。過去,壽命成像一直是一種緩慢、復雜的專業化技術。只有經驗豐富的顯微鏡**或物理學家才會使用這種技術。熒光壽命成像提供了額外的信息,有助提高共聚焦成像的質量。它非常適合用于區分熒光發射光譜重疊的熒光探針,或消除不需要的背景熒光信號。時域和頻域技術在各種熒光顯微壽命成像平臺中都有應用。

熒光壽命成像(Fluorescence Lifetime Imaging ,FLIM))是一種重要的熒光顯微鏡技術,通常用于研究生物分子間相互作用、細胞中的信號事件或區分光譜重疊的熒光團。此外,FLIM 可以提供有關電信號變化、離子和氧含量、溫度、細胞或其環境中的 pH 值的定量信息。熒光壽命成像具有不同于熒光強度成像的眾多優點:不受染料濃度的影響,無論染色或免疫熒光的效率高或低,熒光壽命都能呈現一致的數據,這意味著更少的實驗數量和重復性更好的實驗結果。不受光漂白的影響,熒光發射時間不受激發光強度的影響,因此不存在光漂白問題。不受樣本厚度和光源噪聲的影響。影響熒光壽命成像測量的因素有哪些?湖南動物熒光壽命成像批發

利用熒光壽命成像顯微鏡技術可實現可以實時監控發光納米顆粒在活細胞內的穩定性。廣東三維熒光壽命成像怎么用

典型的熒光壽命成像包括從感興趣區域(ROI)的共焦圖像中提取1-,2-或3-衰減時間。限制熒光團的衰減速率可能是任意的,而且很復雜,因為在細胞環境中存在幾種衰減速率。對于相量圖,關于選擇哪種衰減模型以及評估擬合優度的挑戰性決定已成為過去。在相量圖中,所有原始FLIM數據在向量空間中均表示為相位和幅度。圖像中的每個像素都轉換為相量圖中的一個點。單獨于其在圖像中的位置,具有相似衰減特征的像素在相量圖中形成群集。可以在此陣列中選擇不同的相量簇,并在標注中反向注釋對應的像素。廣東三維熒光壽命成像怎么用

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